6가지 결정을 위한 혁신적인 방법론 개발

Aug 15, 2023

Scientific Reports 13권, 기사 번호: 14172(2023) 이 기사 인용

3 알트메트릭

측정항목 세부정보

6-티오구아닌은 급성 백혈병 및 염증성 장 질환 치료에 사용되는 구아닌 유사체인 면역억제제입니다. 임상 치료 중 6-티오구아닌을 과도하게 사용하면 부작용이 발생할 수 있습니다. 더욱이, 너무 낮은 용량을 제공하는 것은 효과적이지 않을 것입니다. 따라서 임상 적용을 지원하기 위해 체액 내 6-티오구아닌을 정량화하는 신속하고 선택적이며 일상적인 접근 방식이 매우 필요합니다. 5-브로모우라실을 내부 표준으로 사용하여 전혈 샘플에서 6-티오구아닌을 측정하기 위해 완전히 검증된 HPLC 방법이 개발되었습니다. 6-티오구아닌 뉴클레오티드는 과염소산에 의해 적혈구에서 방출된 후 100°C에서 가수분해되어 모체 티오퓨린인 6-티오구아닌으로 전환됩니다. 분석법의 다음 검증 매개변수가 결정되었습니다: 특이성/선택성, 선형성 범위(479~17,118ng/mL, R > 0.992), 검출 한계(150ng/mL) 및 정량화(479ng/mL), 정확도(- 5.6 < 바이어스 < 14.7), 반복성(CV 1.30~3.24%), 중간 정밀도(CV 4.19~5.78%), 추출 회수율(79.1~103.6%) 및 캐리오버. 또한, 다양한 보관 조건에서 전혈 샘플의 약물 안정성을 조사했습니다. 제안된 방법은 약물 수준 모니터링을 위해 전혈 적혈구 샘플에서 6-티오구아닌을 결정하여 정확한 투여량을 결정하는 데 적합합니다.

6-티오구아닌(6-TG)은 구아닌의 퓨린 유사체입니다. 보다 정확하게는 구아닌1의 황 유도체입니다. 6-TG는 티오푸린 계열에 속하며 1950년 백혈병 치료제로 소개되었습니다. 50년 후, 임상의들은 용량 제한 부작용 또는 최적이 아닌 반응으로 인해 아자티오프린(AZA) 또는 메르캅토퓨린(MP)을 투여받지 못한 사람들을 대상으로 염증성 장질환을 치료하기 위해 이 제품을 사용하기 시작했습니다2, 3. 그러나 간독성 프로필에 대한 우려는 광범위한 사용, 특히 결절성 재생 증식증(NRH)4으로 인해 방해를 받습니다. 6-TG는 또한 후천성 면역결핍 증후군, 건선과 같은 자가면역 질환, 급성 백혈병, 특히 급성 골수성 백혈병 및 급성 림프구성 백혈병에 대한 화학요법의 임상 치료에도 사용됩니다5, 6. 6-TG와 관련된 추가 위험은 다음과 같은 발병일 수 있습니다. AZA/MP 및 항TNF 치료제의 사례에서 입증된 바와 같이 림프종, 피부암7, 8. 따라서, 약물의 정확한 용량을 확인하기 위해 정기적으로 6-TG 수치를 확인하는 것이 중요하며, 비정상적인 경우에는 결과는 복용량을 조정하는 것입니다. 6-TG를 포함한 티오퓨린은 약리학적 활성 대사산물인 6-티오구아닌 뉴클레오티드(6-TGN)를 핵산에 결합시켜 면역억제 효과를 나타냅니다9. 결과적으로 이는 세포사멸 유도에 중요한 역할을 포함하여 림프구 증식을 억제합니다10. 6-티오구아닌에 대한 백혈병 세포 저항성을 유발하는 메커니즘은 현재 잘못 이해되고 있지만11 하이포잔틴-구아닌 포스포리보실 전이효소(HGPT) 활성의 감소 또는 부재와 변경된 티오퓨린 S-메틸트랜스퍼라제(TPMT) 활성이 이에 대한 민감성과 저항을 자극한다고 제안되어 왔습니다. 화합물12. 또한, DNA 불일치 복구 시스템의 결함은 6-티오구아닌을 포함한 수많은 항암제 화합물에 대한 획득 저항을 자극하는 것으로 나타났습니다. 6-TG 적혈구 대사물질 수준의 측정은 AZA 투여량의 적절성을 결정하는 데 도움이 되며, 백혈구감소증을 유발하지 않고 개선된 임상 반응을 달성하기 위해 항대사물질 치료 용량을 최적화하는 데 사용될 수 있습니다14. 염증성 장 질환 환자에게 인플릭시맙과 티오퓨린(예: 6-티오구아닌)을 병용하는 것이 단독 요법보다 효과적입니다. 6-티오구아닌과 같은 티오퓨린 약물로 환자 치료를 시작하기 전에 TPMT 활성을 측정하는 것이 권장되며, 이를 통해 티오퓨린 용량을 조정하거나 약물을 완전히 피할 수 있습니다15. 많은 민족에서 TPMT 다형성은 TPMT 활동 감소(10% 유병률) 또는 부재(0.3%)를 초래합니다16. 이러한 유형의 유전적 변이에 대해 동형접합성 또는 이형접합성인 개인은 TGN 대사산물의 수준이 증가할 수 있으며, 대사되지 않은 약물의 축적으로 인해 약물 유발 골수 독성의 위험이 증가할 수 있습니다17. 230 pmol/8 × 108 RBC를 초과하는 6-TGN 수준은 단일 요법 환자의 결과 개선과 관련이 있습니다. 125 pmol/8 × 108 RBC 이상의 6-티오구아닌 수준이 치료적 인플릭시맙 수준을 달성하는 데 적합할 수 있습니다18. 일반적으로 235 pmol/8 × 108 RBC보다 높은 6-TGN 수준은 AZA 또는 6-MP19 환자의 치료 한계 수준으로 권장됩니다. 안전하고 치료적인 수준은 500~800 pmol/8 × 108 RBC20입니다. IBD 환자의 6-TG 치료에 대해 정확한 치료 또는 독성 6-TGN 수준은 아직 설명되지 않았습니다. 그러나 간독성, 특히 결절성 재생 증식증(NRH) 및 정맥 폐쇄성 질환(VOD)은 용량 의존적이며 1000 pmol/8 × 108 RBC21보다 높은 6-TGN 수준과 관련이 있습니다. 임상 치료 중 6-TG를 남용하면 추가 독성 부작용이 발생할 수 있습니다6. 게다가, 과소투여는 효과가 없습니다. 따라서 체액 내 6-TG를 정량적으로 측정하는 신속하고 완벽하게 검증된 접근 방식은 임상 사용에 도움이 되는 데 매우 중요합니다. 현재 면역분석법과 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC)는 치료 약물 모니터링에 광범위하고 실용적이며 민감한 기술입니다22, 23.